高效液相色谱仪流动相常见的问题应要注意哪些？

流动相相当于液相的血液，可以想象对液相的重要程度,那么流动相都需要注意什么呢？

1过滤溶剂

溶剂必须在使用前用5μm过滤器过滤。 如果使用固体化学试剂缓冲盐制备流动相过滤尤为重要，不要让固体颗粒污染泵堵塞取样器和柱过滤器，我们实验室有水溶性和脂溶性两种滤膜供选择反射面，过滤水溶性流动相如甲醇/水，首先用1~2mL甲醇润湿滤膜，以方便快速过滤。

保持储液瓶的清洁

2用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期进行废弃瓶子最后通过一次技术应用HPLC级的水或溶剂清洗不能在数据清洗工作过程中我们留下污迹。

3保证溶剂的质量

一定要使用HPLC级溶剂水也要达到HPLC级，也要使用高纯度的缓冲盐。

一些因流动相引起的常见问题；

1流动相脱气不充分

流动相将产生加热的气体，或不同的流动相组分混合，空气泡进入引起的压力波动的泵，噪声增加，毛刺在色谱图上可试用下列方法进行解决这些问题：流动相再脱气,采用更有效的脱气方法或两种方式方法可以配合我们使用,改系统内混合为一个系统外预混合。

流动相供给不畅

2流动相运行，进气管压力的不稳定性所造成的气体泵,应经常进行观察储液器中流动相的量，加足流动相保证企业所有的样品通过分析处理完毕,输液管上的水槽沉到瓶底，储液器盖子上留一个小孔只是夹住进水管，使其不能上下移动.

梗阻所引起的过滤器管和泵室的空化，压力不稳定,过滤器被微粒所阻塞或长霉去掉一个过滤器后如果管理系统进行运转可以正常说明已找出解决问题，换上新的过滤器则可,有时替换一个新的过滤器仍然低迷，这将需要查找的流动相的准备，或者换句话说，一个大的过滤孔径不管我们如何流动相都需要进行重新过滤。

流量过高，阻力大，导致空化，这是由过滤器孔径、管径、流量和溶剂粘度引起的。如果流速大于10ml / min时，往往这种现象更大。

使用下列方法解决：

（1）使用低流速；

（2）换大孔径的过滤器；

（3）增加进液管道内径；

（4）抬高或加压储液器；

（5）不用过滤器，但流动相一定要先过滤；

（6）储液器盖子太紧在储液器内形成一个真空，打出的流动相不连续,应松开盖或具有1毫米的间隙.

（7）进液管道系统阻塞或弯曲使泵抽不到液注意进行调整进液管道或更换新的,其他问题，包括泄漏或接头松动损坏泵组件，可能导致供应异常。

3流动相和储液器被污染

由于污染噪音增大检测器基线上升,污染物以及可能被泵以稳定的浓度打入一个系统，而再以社会稳定的浓度流出来，所以在进行色谱分析图中不出多余的峰,在塔罐污染物聚乙烯,采用梯度洗脱的顶弱流动相，污染物可能之后在流动相中的伪峰值强度大的增加来洗脱,有时基线噪音突然出现增大或突然可以提高，都是我们因为学生反复加进新的流动相或系统能够用得太久所造成的新加入的流动相有污染物或流动相有长霉滋生细菌..

脏清洗被污染的流将相位累加器,每种企业流动相备有一个专用的储液器或者进行定期报废储液器。

流动相污染来自这几个方面

4试剂质量不高，玻璃器皿不合格；

微生物的影响；

配制流动相时操作不当等；

因此高纯度的HPLC级溶剂和化学试剂;

玻璃器皿按规定进行清洗处理干净；

为防止微生物生长.应每天用甲醇清洗系统；

疑似微生物生长系统可用于稀硝酸漂洗小心，不要损坏管道系统和柱;

真空进行脱气时防止泵油带入企业流动相；

用清洁惰性插头，搅拌棒，和滤光玻璃制剂流动相;

已经严重污染的流动相一定要进行废弃掉。